兽用狂犬病疫苗

修饰的活病毒 （MLV） 和灭活疫苗可以使用原代细胞或连续细胞系在细胞培养物中生产。种子病毒/细胞系统在不同制造商之间差异很大。由于最近疫苗生产技术的改进，可以预期将越来越多地使用灭活疫苗进行动物免疫。

对于大规模犬类疫苗接种活动，建议使用灭活狂犬病疫苗。在现场管理灭活疫苗比活疫苗更容易，因为它对温度变化不太敏感。此外，自我接种的事故不会对疫苗接种者构成任何风险。

每个社区至少 70% 的犬种群应在一个月内接种疫苗。在犬种群周转迅速的地区，可能需要每年开展一次大规模疫苗接种活动。但是，如果疫苗的有效免疫期更长，并且可以相信识别已接种疫苗的犬的系统可以持续一年以上，则应考虑仅对上次运动后进入种群的犬进行疫苗接种的优势，对上次运动期间接种疫苗的犬重新接种疫苗间隔约 2 年。

联合疫苗已经用于犬和猫的免疫接种。犬狂犬病疫苗中含有几种不同的抗原，例如犬瘟热、犬肝炎、钩端螺旋体病和犬细小病毒。猫的联合狂犬病疫苗可能包括各种其他抗原，例如猫泛白细胞减少病毒、猫杯状病毒和猫细小病毒。狂犬病和口蹄疫联合疫苗可用于牛、绵羊和山羊。

在过去的 35 年中，已经开发了几种用于动物口服免疫的改良活 （ML） 狂犬病病毒候选疫苗。1978 年，SAD-Bern 疫苗在瑞士进行了有史以来第一次大规模的狐狸口服疫苗接种现场试验。然而，只有少数方法被证明适合在现场使用。目前使用的所有改良狂犬病病毒活疫苗都是原始 SAD（Street Alabama Dufferin）病毒的衍生物。这些 ML 狂犬病疫苗用于狐狸（例如在加拿大、西欧和中欧）、浣熊（例如在芬兰和爱沙尼亚、立陶宛、拉脱维亚以及俄罗斯）的疫苗接种。

通常装在小袋或泡罩包装中的液体疫苗应加入诱饵中，最好在味道、大小和质地方面适应目标物种。目前使用的所有减毒疫苗均来自原始 SAD （Street Alabama Dufferin） 菌株，在细胞培养物中传代后具有不同程度的减毒。大多数疫苗通过对克隆婴儿仓鼠肾细胞进行连续体外选择或通过在小鼠体内传代来减毒。用于野生动物现场的改良狂犬病病毒口服疫苗可能具有残余致病性，具体取决于病毒株的减毒程度。SAD 相关疫苗（例如 ERA、SAD-Bern、SAD-B19 和 Vnukovo-32）通过脑内、肌内和口服途径对成年小鼠以及许多其他啮齿动物物种致病。SAG2 是一种突变疫苗，通过使用狂犬病病毒糖蛋白单克隆抗体来选择在 333 位携带两个突变的高度减毒病毒。SAG 2 疫苗对小鼠（成年或哺乳动物）以及通过口服、肌肉注射或脑内途径测试的任何野生啮齿动物都是无害的。

SAD 相关疫苗已在该领域得到广泛应用。自 1983 年以来，在欧洲（包括比利时、法国、德国、意大利、卢森堡和一些东欧国家）和自 1989 年以来在加拿大分发了数百万个诱饵，为消除中欧和东欧西部部分地区以及加拿大安大略省的野生动物狂犬病做出了贡献。摄入疫苗诱饵后 SAD 相关疫苗诱发的狂犬病病例首先在瑞士被报道，最近在奥地利、德国、斯洛文尼亚和加拿大的狐狸和其他野生食肉动物中被报道。SAG2 已在该领域广泛用于消除狐狸狂犬病，例如在法国、瑞士和最近的意大利。

疫苗不应在目标物种或非目标物种中诱发任何不良症状。对于非目标物种，应在相关野生啮齿动物和生活在该地区并可能食用诱饵的其他野生和家养物种以及非人类灵长类动物中评估其安全性。从疫苗接种地区的动物中分离出的任何狂犬病病毒都应使用单克隆抗体或分子技术进行表征，以确保没有发生疫苗诱导的狂犬病。

参与疫苗许可或评估口服狂犬病疫苗接种计划的国家控制实验室或政府机构可以在活动前和活动期间验证所有批次疫苗诱饵的病毒滴度。此类测试应在合格的实验室中进行，并采用有记录、经过验证的方法和适当的标准。不建议使用可导致野生动物物种狂犬病的狂犬病病毒株。

如果人类意外暴露于狂犬病病毒减毒疫苗，应就医并考虑暴露后预防。

重组 DNA 技术的发展开启了狂犬病控制的新纪元。重组疫苗不能表现出狂犬病引起的残留致病性，因为它们仅包含单一的非毒力基因产物。改良活病毒疫苗的大多数安全要求也适用于重组疫苗。

通过口服途径在不同靶标和非靶标野生动物物种中测试表达狂犬病糖蛋白的各种重组构建体（例如动物痘病毒或人或犬腺病毒作为载体）。目前唯一大量生产和使用的重组体是表达狂犬病糖蛋白 （VRG） 的基于牛痘的重组产品。

VRG 与亲本牛痘病毒（哥本哈根毒株）具有许多基本特性，但在使载体病毒更安全的其他方面有所不同。当通过脑内和腹膜内途径给药时，胸苷激酶基因的缺失显着降低了疫苗对小鼠的致病性。此外，尚未观察到从目前已知的病毒复制位点传播的病毒，并且包括野生动物在内的数十种动物的口服疫苗接种未发现任何残留致病性。

当对年轻和成年狐狸或浣熊口服（通过直接滴入口中或诱饵）时，10⁸ TCID₅₀（组织培养半数感染剂量）的 VRG 剂量可引起高滴度的病毒中和抗体，并赋予对严重狂犬病攻击的保护。

研究表明，VRG 疫苗对 10 多种鸟类和 35 种哺乳动物物种（包括大多数狂犬病宿主）无致病性。无论疫苗剂量或给药途径如何，接种疫苗的动物在临床上都保持正常，没有明显的大体或组织病理学病变。口服后，VRG 疫苗相对较快地清除（例如在 48 小时内）。未发现流产、致畸或致癌副作用。迄今为止，在欧洲和北美已经报道了对狐狸、浣熊和郊狼的大规模田间试验。

世卫组织狂犬病专家委员会的第八份报告建议，根据 NIH 测试测量的每剂效力低于 1.0 IU 的灭活兽用疫苗，除非设计充分的实验证明疫苗对要使用的物种的免疫持续时间至少为一年，否则不应获得许可或发布。

活疫苗和灭活疫苗的效力应在分发后每隔一段时间确定一次。灭活疫苗（即使是液体形式）和冻干改良活病毒疫苗在适当条件下储存时相对稳定。为了验证储存条件是否足够，建议使用适用于新制造产品的方法对即将过期的现场样品进行测试。

尽管各种改良活病毒和重组疫苗的中位有效剂量 （ED50） 已知，但用于野生动物免疫的口服疫苗的最低效力要求尚未普遍确定。

为了测试口服免疫候选疫苗的功效，在圈养条件下，应保持足够数量的靶标动物，给予疫苗并接受病毒攻击。疫苗的效力应标准化为可量化的水平（例如 CPE/ml、TCID50/ml）。一旦在实验室条件下在目标物种中证明疗效，疫苗应使用与田间试验中使用的诱饵相同的诱饵给药。

测试疫苗的连续稀释度将确定 ED50。然后，动物应在通过肌肉注射途径进行野外应变激发之前至少保持 6-12 个月;疫苗接种和攻击之间的间隔取决于目标物种的周转率。效力估计不应完全基于疫苗在目标物种中诱导病毒中和抗体的能力;环境稳定性测试也是必要的，以证明疫苗效力在田间条件下得以保留。