阿根廷低地貘 （Tapirus terrestris） 麻痹狂犬病的首次报告

1. 引言

狂犬病是一种由狂犬病病毒（Lyssavirus、Rhabdoviridae）引起的人畜共患疾病，狂犬病病毒仍然是全球重大公共卫生问题，每年造成约 59,000 人死亡，超过 370 万残疾调整生命年 （DALY） [1]。该病影响除南极洲以外的各大洲的哺乳动物，其特征是两个主要的流行病学周期：城市狂犬病，其中家犬是主要宿主和传播者，以及森林狂犬病，涉及多种野生和家养物种[2,3]。狂犬病也带来了重大的保护挑战 [4]，狂犬病病毒已在 190 多种野生哺乳动物中检测到，其中包括几种受到威胁的哺乳动物。特别是，家犬的传播与埃塞俄比亚狼（Canis simensis）和非洲野狗（Lycaon pictus）等物种种群的下降有关[5,6]。

在拉丁美洲，流行病学监测对于预防疫情暴发和实现到 2030 年消除犬介导的狂犬病的全球目标仍然至关重要 [7]。然而，主要由普通吸血蝙蝠（Desmodus rotundus）传播的麻痹性狂犬病仍然是畜牧业面临的重大挑战，畜牧业既是病毒的储存库，也是家畜的传播者，导致相当大的经济损失[8,9]。1970 年至 2023 年间，该地区平均每年记录 450 次疫情，其中巴西、哥伦比亚、秘鲁和墨西哥是受影响最严重的国家。与过去几十年相比，2000 年至 2020 年疫情爆发频率的增加凸显了人们对病毒传播的担忧不断升级，尤其是在 2002 年以来跨物种传播事件加剧的情况下。虽然最近疫情规模和牛死亡率的下降 [9,10,11] 表明取得了进展，但持续警惕和有针对性的干预策略对于减轻 Desmodus 传播的狂犬病造成的健康威胁至关重要。有效应对这些挑战对于增强生态系统健康和支持受影响社区的社会经济福祉至关重要。

在阿根廷，狂犬病病例仅与经典狂犬病病毒基因型 1 相关，该基因型包括 5 个已确定的抗原变体（AgV1-4、AgV6），每个变体都与不同的宿主相关 [12]。具体来说，AgV1 和 AgV2 与家犬的狂犬病有关，而 AgV3 与吸血蝙蝠有关。在非噬血蝙蝠和食虫蝙蝠中检测到AgV4，从食虫蝙蝠中分离出AgV6[13]。麻痹性狂犬病于 1928 年首次记录，从巴拉圭通过科连特斯省和福尔摩沙省进入，此后蔓延到南纬 31° 以北和西经 66° 以东。1970 年至 2023 年间，疫情差异很大，每次事件从 1 到 1360 例不等，平均规模为 14.6 例，年发病率为 93.1 例， 表明与巴西和秘鲁等热带国家相比，疫情暴发频率较低 [10]。狂犬病的影响不仅限于牲畜，还会影响牛、马、人类，偶尔也会影响野生动物，野生动物的狂犬病主要与吸血蝙蝠有关[14,15,16,17]。据报道，在牲畜狂犬病暴发期间，已在几种野生物种中检测到该病毒，包括沼鹿 （Blastocerus dichotomus）、红火箭鹿 （Mazama americana） 和水豚 （Hydrochoerus hydrochaeris） [16]。虽然食虫蝙蝠不是狂犬病的主要传播媒介，但它们与病毒传播有关，在巴西狂犬病、Myotis spp.、Eptesicus spp.、Histiotus montanus、Lasiurus blossevillii 和 Lasiurus cinereus 等物种中的阳性率为 3.1% 至 5.4% [18].基因分析已经确定了六种不同的病毒谱系，其中一些与其他美洲国家发现的变体共同传播，并且已经记录了种间传播，特别是在 Lasiurus 物种之间。

在阿根廷北部，被归类为易危物种的低地貘 （Tapirus terrestris） 在维持森林结构和促进种子在其栖息地中传播方面发挥着关键的生态作用。它存在于北部的永加斯、巴拉那森林和北部的查科林地[19]（图1）。该物种面临许多威胁，包括栖息地丧失和退化、破碎化、狩猎以及与人类活动的冲突，这些都导致了种群数量下降[20]。虽然在貘中已经鉴定出各种病原体，如泰勒菌属[21,22]、巴尔通体属[23]、疏螺旋体属[24]、钩端螺旋体、沙门氏菌属以及来自鸟分枝杆菌复合体（MAC）和结核分枝杆菌复合体（MTC）的分枝杆菌[25,26,27]，狂犬病病例极为罕见。以前唯一记录的貘狂犬病病例发生在巴西圣保罗，该动物在那里经历了进行性的神经功能恶化，导致其死亡[28]。在这项研究中，我们介绍了阿根廷低地貘中首例确诊的狂犬病病例，有助于了解这一脆弱物种的狂犬病流行病学，并强调加强狂犬病监测和保护工作的必要性。

2. 材料和方法

3. 结果

4. 讨论

这项研究介绍了阿根廷低地貘的首例确诊狂犬病病例，这是继巴西圣保罗之后该地区第二次记录在案的狂犬病病例。在阿根廷貘中观察到的临床体征和组织病理学发现与巴西病例中报道的非常相似[28]。两只貘都表现出神经系统症状，包括进行性瘫痪和侧卧位，在初步明显改善的初始阶段后，它们的病情迅速恶化。2 例的组织病理学分析均显示非化脓性脑炎，其特征为血管周围淋巴细胞袖口、胶质增生和嗜酸性粒细胞胞浆内包涵体，提示狂犬病病毒感染。

在我们的研究中，狂犬病病毒及其抗原变体 3 的鉴定是通过诊断技术的组合实现的，包括 DIF、带有减少单克隆抗体组的 IIF、BHK-21 细胞中的病毒分离、实时 RT-PCR、常规 PCR 和序列分析。虽然 Pereira 等人 [28] 在巴西报道的狂犬病病例提供了有价值的见解，但在我们的研究中纳入分子诊断提高了研究结果的准确性，并提供了有关狂犬病变异在该地区不同宿主之间传播的更多信息。Caraballo等[34]最近的研究表明，狂犬病病毒变异株2的宿主发生了变化，包括传播到食蟹狐（Cerdocyon thoous），强调了狂犬病病毒进化和传播的复杂动力学。这些发现强调了类似的遗传和生态学方法的必要性，以阐明该地区普遍变异的动态，并了解它们对家畜和野生动物种群的影响。

土地利用的变化，包括城市化和农业集约化，已经显著改变了野生动物可利用的饮食资源[35]。在拉丁美洲，农业和畜牧业扩张导致的森林砍伐促进了 D. rotundus 的地理传播，这是一种专性噬血物种，分布范围从墨西哥到阿根廷北部。了解环境变化如何影响 D. rotundus 的摄食行为对于预测对疾病生态学、公共卫生和生态系统动态的潜在影响至关重要。Johnson等[36]记录了畜牧业的集约化创造了稳定而丰富的血液来源，促进了人口增长，并使圆形石斛成为该地区狂犬病病毒的主要森林宿主。

在我们的案例研究中，感染归因于 D. rotundus 的传播，已知栖息地的接近和对 Guaycolec 野生动物站蝙蝠活动的直接观察证明了这一点，这表明貘是通过被感染的蝙蝠咬伤而感染病毒的。在福尔摩沙省，2011 年至 2020 年期间确认了 15 例由 D. rotundus 引起的家牛狂犬病病例，显示阿根廷同期病例呈上升趋势 [37]。这一情景与巴西Pereira等[28]的研究结果一致，巴西的病例记录在与受保护环境区相邻的地区，以及靠近农业用地和城市环境的地区，这些地区为狂犬病宿主提供了合适的栖息地和营养资源。

阿根廷福尔摩沙省的特点是气候温暖，冬季最高气温在 21.1 °C 和夏季 32.5 °C 之间，4 月是降水高峰期之一，为蝙蝠活动创造了有利的环境。温度是调节蝙蝠行为的相关因素，尤其是在响应资源碎片化时。最近的研究表明，温度会影响觅食飞行的持续时间，这会影响 D. rotundus 根据资源碎片化调整觅食范围的能力 [38,39]。这里报告的貘狂犬病病例发生在 2024 年 4 月，当时正值雨季，3 月经历了严重的热浪，气温达到 40.3 °C。 虽然该地区没有观察到一致的狂犬病季节性流行病学趋势[14]，而且该事件不太可能与季节性气候因素直接相关;有必要进行进一步的全年研究，以探索气候条件对该地区狂犬病动态的潜在影响，特别是与土地利用变化增加有关的影响。

目前关于貘狂犬病暴露的数据有限。除了在圣保罗记录的1只血清阳性貘[40]外，对巴西3个生物群落中125只野生貘的血清学研究并未显示表明病毒持续传播的抗体滴度[36]。这强调了进一步研究以阐明低地貘狂犬病流行病学的必要性。尽管先前的研究表明貘对狂犬病的内在易感性较低[41,42]，并且估计通过叮咬传播的可能性仅为0.15%[43]，但越来越多的报道表明，在自然栖息地中，噬血性蝙蝠和貘之间相互作用的报道[43,44]表明，蝙蝠相关变异可能构成比以前预期的更大的流行病学风险。

这些观察结果将引导我们回顾野生食草动物在狂犬病生态学中的作用。在貘和其他野生食草动物中很少检测到狂犬病可能是由于内在易感性低和监测有限。鉴于越来越多的证据表明野生食草动物和吸血蝙蝠在退化环境中相互作用，因此必须加强监测系统以准确评估传播风险，并为高风险地区的有针对性的保护和公共卫生干预措施提供信息。我们的研究结果在阿根廷狂犬病流行病学的背景下特别相关，那里的多种抗原变体与各种宿主物种有关，而蝙蝠介导的传播是一个公认的现象。本案例也与巴西 Ventura 等 [45] 提出的关于狂犬病对野生食草动物威胁的担忧一致。尽管该疾病主要在牛和马中记录，但在野生食草动物中发现它带来了更广泛的流行病学挑战，因此有必要将这些物种纳入监测和预防策略。在这种情况下，应考虑对野生动物站其他动物可接近的围栏内的易感圈养物种（包括貘）进行狂犬病疫苗接种。在我们的案例中，SENASA 的当地办事处已经实施了全面的疫苗接种运动并加强了流行病学监测，不仅针对貘，还针对其他潜在的哺乳动物宿主（美洲狮、猴子和鹿）。此外，还采取了管理当地蝙蝠种群的标准化措施[13]。

最后，正如 Pereira 等人 [28] 之前所描述的那样，在圈养貘中检测到狂犬病再次证实了该物种对病毒的易感性，加剧了栖息地丧失、破碎化和人类活动扩张带来的现有威胁。这一发现加强了了解人类-野生动物界面物种之间传播风险的重要性，在多种易感物种共存的环境中，这一问题更加严重。加强南美洲的综合疾病监测对于识别新出现的风险、保护生物多样性以及减轻狂犬病对家养和野生食草动物的经济和生态后果非常重要。

在“同一个健康”框架内[4,46]，当在野生动物中观察到神经系统症状时，必须加强监测策略和教育，以提高对狂犬病的认识。此外，正在进行的地理定位和研究蝙蝠栖息地、评估种群动态和制定具体干预策略的努力也是相关的。通过先进的分子技术研究狂犬病病毒变体的遗传多样性和进化，以及分析人类与野生动物之间的相互作用，特别是不同蝙蝠物种在传播中的作用，将至关重要。最终，探索环境变化和人类活动对疾病出现和传播的影响将有助于更全面地了解狂犬病动态。

5. 结论

这项研究介绍了阿根廷首例确诊的低地貘狂犬病病例，突出了扩大监测工作以纳入非传统宿主的迫切需要[47]。在通常与狂犬病无关的物种中鉴定抗原变体 3 强调了病毒复杂的流行病学动态及其在不断变化的环境中传播的可能性。尽管貘历来被认为易感性较低，但在退化景观中与吸血蝙蝠的互动增加表明，这种风险目前可能被低估了。

本案的含义强调了对疾病监测和管理采用综合 One Health 方法的必要性。在圈养貘中检测到狂犬病引发了人们对野生动物-牲畜-人类界面物种间传播的担忧，尤其是在吸血蝙蝠的自然种群受到人类活动严重影响的地区。在此背景下，加强监测策略和提高诊断能力对于减轻未来的疫情和了解不同生态系统中狂犬病的流行病学至关重要。

此外，本研究强调了狂犬病生态学中的关键知识差距，特别是关于野生食草动物作为潜在宿主的知识差距，强调了未来对狂犬病病毒变异的遗传和生态研究以及环境变化对宿主病原体动态的影响的研究的必要性，以便为有效的保护策略提供信息并保护狂犬病流行地区的公共卫生。

作者贡献

概念化、M.C.G. 和 M.M.O.;方法学，M.C.G.、L.M.、G.A.C.、M.J.Z.、L.P.N.、M.A.F.、L.C.、V.D.M.、M.C.A. 和 S.E.R.;验证、M.M.O. 和 S.E.R.;形式分析，M.C.G.、M.M.O. 和 S.E.R.;调查、M.C.G.、M.J.Z.、L.M.、M.M.O.、P.D.A. 和 S.E.R.;资源，M.C.G.、L.M. 和 S.E.R.;数据管理、M.C.G. 和 M.M.O.;写作——初稿准备，M.M.O.;写作——审查和编辑、M.M.O.、M.C.G.、L.M.、G.A.C.、M.J.Z.、L.P.N.、M.A.F.、L.C.、V.D.M.、M.C.A.、P.D.A. 和 S.E.R.;可视化、M.C.G.、L.M. 和 M.J.Z.;监督，S.E.R.所有作者均已阅读并同意手稿的已发表版本。

机构审查委员会声明

根据 2/24 协议，所有涉及动物的实验程序均于 2024 年 4 月 25 日获得 Comité Institucional para el Cuidado y Uso de Animales de Experimentación （CICUAE）—DGLyCT-SENASA 的批准。

知情同意书

不適用。

数据可用性声明

本文包含本研究中提供的原始贡献。如需进一步咨询，请直接联系通讯作者。

利益冲突

作者声明没有利益冲突。

资助声明

这项研究没有得到外部资助。