流感检测方法概述

背景

对于疑似流感的门诊患者，不需要进行流感病毒检测来进行流感的临床诊断，特别是在流感活动增加期间，季节性甲型和乙型流感病毒正在当地社区传播。然而，当结果可能影响临床决策时，如是否开始抗病毒治疗、进行其他诊断检测或实施流感感染预防和控制措施，流感病毒检测可以通知临床管理。建议对所有住院的疑似流感患者进行流感病毒检测。最重要的是，临床医生应该了解流感病毒检测的局限性，以及如何正确解释结果，尤其是阴性结果结果。在封闭环境(如医院、长期护理机构、游轮、寄宿学校、夏令营)中的呼吸系统疾病爆发期间，流感病毒感染检测对于确定流感是否是爆发。

测试类型

可用于检测呼吸道标本中流感病毒的诊断试验包括分子分析(包括快速分子分析、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和其他核酸扩增测试)；和抗原检测试验(包括快速流感诊断测试和免疫荧光检测)。病毒培养对公共卫生目的很重要，但不能提供及时的结果通知临床管理。呼吸道标本中流感病毒检测的敏感性和特异性可能因所用检测类型、从发病到标本采集的时间、采集标本的质量、标本的呼吸道来源、标本的处理和加工以及从标本采集到检测的时间而异。流感病毒检测的检测后概率或预测值(阳性和阴性预测值)取决于患者人群中流行的季节性流感病毒，以及与“金标准”比较检测(分子检测或病毒培养)相比的特定检测特征(敏感性和特异性)。与任何诊断试验一样，结果应在卫生保健提供者可获得的其他临床和流行病学信息的背景下进行评估。血清学检测不能及时提供临床管理决策所需的结果。

美国传染病学会(IDSA)建议使用快速流感分子检测法代替快速流感诊断试验(RIDTs)来检测门诊患者呼吸道标本中的流感病毒。IDSA建议使用RT-PCR或其他分子检测方法检测住院患者呼吸道标本中的流感病毒。请参考IDSA流感临床实践指南有关流感测试的建议和测试结果解释的信息。

快速分子分析

快速分子检测是一种分子流感诊断试验，以高灵敏度(90-95%)和特异性检测上呼吸道标本中的流感病毒核酸。FDA批准的快速分子检测可以在大约15-30分钟内产生结果。这些快速分子检测中的一些是临床实验室改进修正案(CLIA)-免除护理点使用。

其他分子分析

逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和其他分子测定法可以以非常高的灵敏度和特异性识别呼吸道标本中流感病毒RNA或核酸的存在。一些分子分析能够检测和区分甲型流感病毒和乙型流感病毒的感染；其他测试可以识别特定的季节性甲型流感病毒亚型[A(H1N1)pdm09或A(H3N2)]。这些检测可以在大约45分钟到几个小时内产生结果，具体取决于检测。值得注意的是，通过这些分析检测流感病毒RNA或核酸并不一定表明检测到存活的传染性病毒或正在进行的流感病毒复制。值得注意的是，并不是所有的检测都被FDA批准用于诊断。一些多重分子分析可用于检测流感病毒核酸并区分流感病毒感染和其他呼吸道病原体，也可用于管理严重免疫抑制患者，或用于确定呼吸道疾病机构爆发的原因。

快速流感诊断测试

快速流感诊断试验(RIDTs)是一种抗原检测试验，可以在10-15分钟内以中等灵敏度(50-70%)和高特异性检测流感病毒抗原。一些测试是CLIA豁免的，并被批准用于任何门诊设置，而其他测试必须用于中等复杂的临床实验室。一些RIDTs利用读数装置将结果标准化以提高灵敏度(75-80%)。FDA现在要求RIDTs达到80%的灵敏度。检测到流感病毒抗原并不一定表明检测到了存活的传染性病毒或正在进行的流感病毒复制。

没有一种快速流感诊断试验提供关于甲型流感病毒亚型的信息。可接受使用的标本类型(即鼻咽或鼻腔吸出物、拭子或洗液)也因检验而异。快速流感诊断试验的特异性，尤其是敏感性低于病毒培养和RT-PCR，并因试验而异。大多数可以在医生办公室进行的快速流感诊断试验对检测流感病毒抗原的灵敏度约为50-70%,特异性大于90%。最近，FDA对RIDTs进行了重新分类，并公布了提高准确性的要求，包括更高的灵敏度。低到中等灵敏度和高特异性的检测比假阳性结果更容易产生假阴性结果，尤其是在社区流感活动高峰期。由于快速流感诊断检测的敏感性较低，临床医生应考虑用分子检测确认阴性检测结果，尤其是在社区流感活动高峰期和/或疑似机构流感暴发期间，因为可能出现假阴性RIDT结果。相比之下，假阳性RIDT结果的可能性较小，但在流感活动较低的时期可能发生且更常见。因此，在解释快速流感诊断测试的结果时，临床医生应考虑其所在社区的流感活动水平(参见在流感病毒在社区传播期间，帮助解释流感检测结果和临床决策的算法和在流感病毒未在社区传播期间，帮助解释流感检测结果和临床决策的算法了解更多信息)。应咨询包装说明书和进行检测的实验室，了解有关使用快速流感诊断检测的更多详情。

免疫荧光

免疫荧光分析是抗原检测分析，通常需要使用荧光显微镜在大约2-4小时内产生中等灵敏度和高特异性的结果。直接(DFA)和间接荧光抗体(IFA)染色试验均可用于检测呼吸道标本中的甲型和乙型流感病毒抗原。

病毒培养

病毒培养结果不能及时提供给临床管理人员。方瓶组织培养结果可能需要1-3天，而传统的组织细胞病毒培养结果可能需要3-10天。然而，病毒培养允许对流感病毒进行广泛的抗原和基因表征。采集一些呼吸道样本进行病毒培养，对于监测可能需要纳入下一年流感疫苗的新季节性甲型和乙型流感病毒株并确定其抗原特征至关重要。

血清学测试

临床决策不建议进行流感血清学检测。尽管一些商业实验室提供了针对单个血清标本的甲型或乙型流感病毒抗体的血清学检测结果，但这些结果无法得到可靠的解释。用于诊断流感的适当血清学检测需要间隔2-3周收集成对的急性和恢复期血清，并在有限数量的公共卫生或研究实验室进行可靠的检测，以评估流感病毒株特异性抗体增加4倍或更多。因此，流感血清学检测不能提供及时的结果来帮助临床决策，除研究和公共卫生调查外，不推荐使用。

新型甲型流感病毒感染

如果怀疑人类感染了动物来源的新型甲型流感病毒(如甲型禽流感病毒或甲型猪流感病毒)，应联系当地和州卫生部门，对季节性流感病毒和新型甲型流感病毒进行RT-PCR。市售的流感诊断试验不能特异性检测新型甲型流感病毒，甲型流感病毒的阳性结果也不能区分季节性甲型流感病毒与禽或猪甲型流感病毒感染。有关新型甲型流感病毒的信息，请访问:

• 测试、报告和实验室信息
• 临床医生关于人类感染变异流感病毒的临时指南
• 表1:流感病毒检测方法