戊型肝炎病毒：靶向治疗和诊断的新见解

戊型肝炎病毒（HEV）引起的肝脏炎症的常见症状包括发烧、腹痛、大便苍白、恶心和黄疸。有这种感染风险的个体包括免疫系统较弱（免疫功能低下）的人以及孕妇。免疫功能低下的患者经常患有慢性感染，这对全球北方来说是一个更大的问题。

孕妇经常患有严重病例（暴发性肝炎）。这种类型的肝炎与高达30%的死亡率有关，主要发生在全球南方。地理差异可以解释为人畜共患的食源性戊型肝炎病毒株（基因型3和4）主要在北部传播，而主要在水传播的基因型1和2分布在南部。

到目前为止，欧洲尚未批准针对戊型肝炎病毒的疫苗。尽管有用于治疗感染的药物，但治疗选择仍然有限，并且与强烈的副作用或耐药性的发展有关。这也是由于缺乏对病毒生命周期的大部分了解。

病毒多蛋白 pORF1——病毒基因组产生的核心，但几乎不为人知

HEV遗传信息的复制（基因组复制）是通过病毒多蛋白pORF1介导的。该蛋白质由多个结构域组成。蛋白质结构域是蛋白质内的稳定折叠结构，在功能和结构上独立于相邻的蛋白质片段。

pORF1是复制（复制酶）的中心蛋白，这意味着它负责病毒遗传信息的繁殖。然而，人们对pORF1知之甚少，包括其在感染细胞中的确切位置。

由Mirco Glitscher博士领导的研究人员在Paul-Ehrlich研究所病毒学部门负责人Eberhard Hildt教授的工作组中专注于这种重要的未知HEV元素。在他们的研究中，他们使用共聚焦激光扫描显微镜来分析pORF1及其各个结构域的亚细胞定位，这些结构域是在病毒复制酶的结构预测的基础上生成和克隆的。

使用超速离心分离从细胞中释放的外泌体，并通过等密度（根据相同密度分离）密度梯度离心进行分析。然后通过荧光法、蛋白质印迹分析或RT-qPCR更仔细地检查分离的颗粒。

囊泡系统是病毒繁殖的基石

研究小组发现，pORF1在细胞的囊泡系统（内体系统）中积累，主要在多囊泡体（MVB）中积累。这些结构是外泌体形成的核心，迄今为止仅被视为释放病毒HEV颗粒的宿主结构。这里病毒复制酶的存在被鉴定为依赖于 pORF1 结构域，即 PCP（木瓜蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶）。

因此，研究小组发现病毒复制酶也通过外泌体释放。该过程由作为复制酶一部分的病毒蛋白酶介导。因此，即使在没有病毒颗粒的情况下，病毒基因组也会通过这种途径释放。

研究结果表明，pORF1以PCP依赖性方式进入MVB，随后释放外泌体。因此，病毒的释放和复制，遗传信息的繁殖，可能在空间上是耦合的。这可能会促进病毒感染的传播，因为在再次感染期间进入细胞的基因组可以迅速遇到外泌体传播的pORF1并被复制。此外，收集的数据表明，衣壳不一定是遗传物质释放所必需的。

外泌体和相关蛋白质结构可能是治疗HEV的合适靶标，因为这可能会阻止病毒复制和病毒释放。HEV基因组的衣壳非依赖性释放肯定会对诊断产生影响，因为迄今为止一直认为病毒颗粒和病毒基因组的数量存在相关性。

然而，当涉及到诊断程序时，仍然必须研究没有衣壳的外泌体中存在基因组RNA的相关性。

该研究发表在《细胞和分子胃肠病学和肝病学》杂志上。