第二章 粪便标本的采集与运送

粪便标本应在肠道疾病发病早期采集，此时粪便中病原体载量最高，且需在患者启用抗生素治疗前完成采样（表 2-1）。

患者出现腹泻时，于发病后尽快采样（最好在发病 4 日内），且未接受抗菌药物治疗。

直肠拭子，或蘸取新鲜粪便后置于运送培养基内。

卡瑞 – 布莱尔（Cary-Blair）培养基或其他适配运送培养基；霍乱弧菌不可使用缓冲甘油盐水。

若标本可在 48 小时内送达实验室，置于 4℃冷藏；如需长期保存则冻存于 – 70℃。

疑似霍乱患者粪便标本可常温运送、短期存放，冷藏为优选方案。

拧紧标本管 / 容器防渗漏，整体装入防水容器隔绝冰水 / 干冰；置于带冰袋、碎冰或干冰的保温箱，加急隔日送达运输。

应采集 10～20 名符合以下全部条件人员的粪便标本或直肠拭子：

使用洁净容器采集患者粪便，容器无消毒剂、洗涤剂残留，配套密封防漏旋盖。禁止从便盆内取样，便盆易残留消毒剂或其他污染物。

未加保存液的新鲜粪便尽量冷藏，采集后最长 2 小时内完成接种培养；若 2 小时内无法培养，需立即放入运送培养基并冷藏。

取无菌棉拭或聚酯拭子插入粪便中旋转蘸取少量粪便；若粪便含黏液、肠黏膜碎屑，需优先蘸取该部分。

立即将拭子放入运送培养基（条件允许时培养基需提前预冷 1～2 小时）。拭子杆完全伸入管底，将手部握持的拭子杆上段折断丢弃，拧紧旋盖，放入冰箱或冷藏箱保存。

直肠拭子操作步骤：将拭子预先蘸取无菌运送培养基，插入肛门括约肌 2～3 厘米（1～1.5 英寸）后旋转，取出后确认拭子表面沾有粪便。

按上文方法立刻放入预冷的运送培养基，拧紧管盖冷藏。

所需拭子数量取决于接种平板种类；若需同时检测多种病原体，每位患者至少采集 2 份粪便拭子 / 直肠拭子，两份拭子可放入同一支运送培养基管内。

卡瑞 – 布莱尔培养基可用于志贺菌、霍乱弧菌、大肠埃希菌 O157:H7 等多种肠道致病菌转运（图 2-1）。该培养基为半固体质地，便于运输；配制完成后常温可保存 1 年。

培养基 pH 值高达 8.4，是保存、转运霍乱弧菌的首选培养基。

严格按照厂商说明书配制（市面有多种商品化干粉制剂，部分配方需额外添加氯化钙，部分无需；也可自行称量原料配制）。

分装时保证培养基液面完全浸没拭子，液面高度至少 4 厘米；例如 13×100 毫米旋盖管，每管分装 5～6 毫升。

松盖后 100℃流通蒸汽灭菌 15 分钟，不可高压蒸汽灭菌；灭菌结束后拧紧管盖。

密封避光低温储存可长期稳定；无体积损耗、无污染、无变色情况下，有效期最长 1 年。

阿米斯（Amies）培养基、斯图尔特（Stuart）培养基与卡瑞 – 布莱尔培养基作用相近，均可转运志贺菌、大肠埃希菌 O157:H7，但保存霍乱弧菌效果远不及卡瑞 – 布莱尔培养基。

碱性蛋白胨水（APW）可临时转运霍乱弧菌，效果劣于卡瑞 – 布莱尔，仅在无卡瑞 – 布莱尔培养基时使用。

若采集后超过 6 小时无法转种，禁止使用碱性蛋白胨水；6 小时后杂菌会过度增殖，掩盖弧菌。

缓冲甘油盐水（BGS）常用于志贺菌转运，完全不适用于霍乱弧菌；另有两大缺陷：配制后仅能使用 1 个月；液体质地，运输途中极易渗漏洒出。

常温存放的运送培养基，使用前尽量预冷 1～2 小时。浸泡于运送培养基的标本全程冷藏直至检测。

若采集后 2～3 天以上才能培养，建议直接冻存于 – 70℃。冷藏标本最长 7 天仍可分离出致病菌，但采集 1～2 天后阳性检出率会明显下降。

志贺菌相较于其他肠道菌更为脆弱，因此使用卡瑞 – 布莱尔培养基的标本必须尽快接种、冷藏或冷冻。

霍乱患者粪便标本若运输环境温度不超过 40℃，可不冷藏；仅环境温度＞40℃时需冷藏。

无运送培养基、疑似霍乱标本应急方案：取滤纸、纱布或脱脂棉浸透稀粪便，装入密封塑料袋，密封保湿防止干燥；可滴加数滴无菌生理盐水延缓干涸。

运输时冷藏更佳，非必需。

该方法不适用志贺菌、大肠埃希菌 O157:H7 转运；保存霍乱弧菌效果也远弱于标准运送培养基。

标本管清晰标注标本编号，尽可能标注患者姓名、采样日期；使用耐水记号笔书写于试管磨砂面。无磨砂面时，将信息写在医用胶布上牢固粘贴于容器外壁。

患者信息同步登记在送检数据表，一份随标本运输，一份由送检单位留存；数据表模板见附录 F。

航空运输包装需遵循国际航空运输协会《危险品规则（DGR）》，相关包装规范汇总于第 13 章《临床标本与病原微生物的包装及运输》。陆路运输也可参照该规范包装所有感染性、潜在感染性样本。

冷藏标本装入保温箱，内置冷冻冰袋或碎冰。若使用碎冰，所有标本管装入密封防水塑料袋，隔绝融水浸湿标本。

冷冻标本需干冰运输，遵守以下防护要求：

美国疾病预防控制中心。胃肠炎暴发实验室标本采集指南。发病率与死亡率周报，1990;39 (增刊 RR-14)

美国疾病预防控制中心。霍乱弧菌诊断实验室操作方法。佐治亚州亚特兰大：美国 CDC，1994

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