水痘带状疱疹病毒的实验室检测(VZV)

This entry is part 16 of 20 in the series 水痘

Laboratory Testing for Varicella-Zoster Virus (VZV)

要点

  • 本水痘-带状疱疹病毒(VZV)实验室检测信息适用于原发性VZV感染(水痘)和复发(带状疱疹)的检测和诊断。
  • 聚合酶链反应(PCR)是确认水痘和带状疱疹病例的最有帮助的实验室测试。
  • CDC疱疹病毒实验室可以提供几种类型的VZV特异性检测。
This photomicrograph reveals the intranuclear inclusions produced by the varicella-zoster virus grown in a tissue culture; Magnified 500X.

概观

实验室检查可能是有用的,尤其是在临床表现不太典型的情况下。

测试建议:

  • 确诊水痘疑似病例。
  • 确认水痘是爆发的原因。
  • 在严重病例(住院或死亡)或异常病例中确认水痘。
  • 确定对水痘的易感性。
  • 确定疑似疫苗相关不良事件是否由疫苗株VZV引起。

资源实验室

CDC疱疹病毒实验室:

CDC疱疹病毒实验室可以向需要VZV感染确认证据或确认非典型带状疱疹病例的州和地方公共卫生部门免费提供几种类型的VZV特异性检测。该实验室还为参与各种流行病学和实验室研究的医生和科学家进行免费检测。

也可以提交疑似疫苗相关不良事件的标本,包括:

  • 接种疫苗后7至42天出现皮疹
  • 怀疑疫苗病毒的二次传播
  • 接种疫苗者出现带状疱疹
  • 任何严重的不良事件

有关VZV标本采集、储存和处理的更多信息,请联系CDC疱疹病毒实验室。

联系信息:

CDC疱疹病毒实验室
疾病控制和预防中心
东北克利夫顿路1600号
佐治亚州亚特兰大市,邮编30333
电话:404-639-5455或404-639-6403

测试类型

水痘的检测建议

这是一个可视化工具,总结了可用的测试类型以及何时收集麻疹、腮腺炎、风疹和水痘样本。

聚合酶链式反应

PCR是确认疑似水痘和带状疱疹最有用的实验室检测。PCR可以快速灵敏地检测皮肤病变(水疱、结痂、斑丘疹性病变)中的VZV DNA。

用于PCR检测的标本

  • 如果出现水疱性病变或结痂,最好进行取样。
  • 从接种疫苗的人的斑丘疹病变中充分收集标本可能是一个挑战。
    • 然而,一项研究表明1比较来自接种一剂疫苗的相同患者的多种标本表明,用适当技术收集的斑丘疹样病变是用于检测VZV的高度可靠的标本类型。
  • 其他来源,如鼻咽分泌物、唾液、尿液、支气管冲洗液和脑脊液不太可能提供足够的样本;它们经常导致假阴性结果。

DFA试验、病毒培养和赞克涂片

用于确认水痘的其他病毒分离技术是直接荧光抗体分析(DFA)和病毒培养。然而,通常不推荐这些技术,因为它们不如PCR灵敏。在病毒培养的情况下,这些技术需要更长的时间才能产生结果。

像DFA一样,Tzanck涂片具有快速的周转时间,但不推荐使用,因为它的敏感性有限,并且不是VZV的特异性。此外,实时PCR方案可以在一天内完成。

血清学试验

血清学方法在实验室确认带状疱疹方面用途有限,仅应在没有合适的PCR检测标本时使用。

IgM血清学检测比皮肤损伤的PCR检测灵敏度低得多。IgM血清学为近期的活动性VZV感染提供了证据。然而,它不能从潜伏期区分初次感染和再感染或再激活。这是因为每次接触VZV都会产生特异性IgM抗体。IgM试验也天生倾向于特异性差。

血清学试验用标本

测量急性和恢复期血清也具有有限的价值,因为很难检测出用于带状疱疹实验室诊断的IgG的增加。

显示IgG抗体上升4倍的成对急性和恢复期血清对水痘具有极好的特异性。然而,对于水痘的诊断,它们不如皮肤损伤的PCR敏感。先前有疫苗接种史或疾病史的人可能具有非常高的基线滴度,并且在恢复期血清中可能不会达到4倍的增加。这种用于诊断水痘的方法的有用性进一步受到限制,因为它需要两次就诊。单个阳性IgG ELISA结果不能确认水痘病例。

实验室指南

  • 优选的诊断方法是通过PCR试验从临床标本中证实VZV DNA,所述临床标本理想地是痂、泡状液或来自病变基底的细胞。
  • PCR也可用于确认突破性水痘。其他方法,如DFA和培养,也可用于诊断,但不如PCR灵敏和特异。
  • 当出现水痘样皮疹时,水痘-带状疱疹免疫球蛋白M (IgM)抗体血清学试验呈阳性。
  • 通过急性和恢复期血清之间的任何标准血清学试验,血清水痘免疫球蛋白G (IgG)抗体滴度升高4倍或更多。

对于未接种疫苗和接种疫苗的人来说,PCR是确认VZV感染最可靠的方法。

标本收集

了解收集和运送VZV检测(水痘和带状疱疹)标本的指南。这些包括VZV血清学检测和VZV PCR/基因分型的方法,合适的供应来源,以及如何向CDC提交标本。

病毒株鉴定

PCR检测和基因分型可以区分VZV的野生型VZV和疫苗型(Oka/Merck)毒株。

这种测试用于识别两种VZV病毒株非常重要的情况,如疑似疫苗不良事件。可能的水痘疫苗不良事件包括:

  • 接种疫苗后7至42天的接种者出现水痘或水痘相关并发症。
  • 接种疫苗者出现带状疱疹。
  • 疑似二级疫苗株VZV传播。

还可以对血液、脑脊液、活检或尸检样本进行疫苗株/野生型VZV鉴别试验,以确认病因并确定疫苗不良事件。但是,这些标本会导致假阴性结果。

专业实验室:

CDC疱疹病毒实验室和APHL疫苗可预防疾病参考中心可以使用菌株差异实时PCR和PCR结合限制性片段长度多态性来区分野生型VZV和Oka菌株。每个中心(WI,CA,NY,MN)从指定的州接收标本。

评估VZV敏感性

IgG ELISA

单一血清学IgG测试可以确定一个人是否具有既往水痘疾病的VZV抗体,或者谁可能是水痘带状疱疹免疫球蛋白(VZIG)的候选人。在美国可以买到的产品是VariZIG。

推荐使用商业酶联免疫吸附试验(ELISAs)进行筛查。全感染细胞(wc) ELISA是确定一个人是否具有来自既往水痘疾病的VZV抗体的最常用测试。从血样中提取的Wc ELISA可以容易地检测到VZV自然感染的血清转化。

接种疫苗后常规检测水痘免疫是不必要的,因为市售的VZV IgG检测法不够灵敏,不足以检测接种疫苗后的所有血清转化。

更敏感的纯化糖蛋白ELISA (gpELISA)已用于研究环境中检测疫苗接种后的血清转化。然而,用gpELISA进行测试在商业上是不可行的。

IgG亲和力

研究环境中的IgG亲和力决定了一个VZV IgG阳性的人是否在过去或最近感染过病毒。

疾病预防控制中心的实验室开发了一种IgG亲和力测定法,可确定最近的VZV皮疹是由于原发感染(水痘)还是再活化(带状疱疹)。

  • 高亲和力是远程感染的标志。
  • 低亲和力是VZV原发感染的指标。

过去被感染的人往往具有与抗原结合亲和力高的抗体。新近感染的人往往亲和力较低。

接种疫苗的人在接种疫苗后经历抗体亲和力成熟,这导致中等至高IgG亲和力的VZV抗体。对接种疫苗人群的VZV亲和力的测量不太可能区分VZV的远程感染(或接种疫苗)和近期(突破性)感染。这种测试在商业上是不可行的。

建立水痘免疫的实验室证据

IgG ELISA

阳性IgG ELISA结果表明一个人在过去的水痘疾病或疫苗接种中具有VZV抗体。该测试不能区分抗体是否来自水痘或疫苗接种的既往发作。

虽然许多商业VZV IgG ELISA表现良好,足以检测野生型病毒感染的血清转化,但这些方法的性能规格(特异性和敏感性)差异很大。

IgG检测

一些市售的VZV IgG检测是不可靠的,即使是检测人类的自然疾病史。目前,还没有足够敏感和特异的商业化VZV IgG方法来可靠地检测疫苗的血清转化。

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