CDC DENV-1-4实时rRT-PCR多重检测

CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重检测方法的特点

CDC DENV-1-4 rRT-PCR检测是一种NAAT，用于在疑似有症状的登革热病例中检测登革热病毒并对其进行分型。该试验从采集自人类患者的血清或血浆中检测登革热病毒血清型1、2、3或4。

CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重检测试剂盒包括:

• 寡核苷酸引物和双标记水解(Taqman)探针，用于从具有与登革热(轻度或重度)一致的体征和症状的人类患者收集的血清或血浆中体外定性检测登革热病毒血清型1、2、3或4。
• 阳性对照病毒混合物，其由热灭活的DENV-1 Haw、DENV-2 NGC、DENV-3 H87和DENV-4 H241组成。
• 人类标本质控品(HSC)是一种非感染性培养的人类细胞材料，可在检测中提供阳性信号，并证明RNA的成功回收以及RNA提取试剂的完整性。

CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重分析可在单重分析(在单独的反应中检测每种DENV血清型)或多重分析(在同一反应中检测四种DENV血清型)中进行。这两种格式提供了同等的灵敏度。

疾病控制中心的预期用途

CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重检测旨在应用生物系统(ABI) 7500快速Dx实时PCR仪器上用于以下目的:

• 在从具有与登革热一致的体征和症状的患者收集的血清或血浆中诊断登革热。
• 从登革热患者血清或血浆(柠檬酸钠)中的病毒RNA鉴定DENV血清型1、2、3或4
• 为监测流行性登革热病毒提供流行病学信息
• 该检测应用于在患者症状出现后的前7天内收集的标本。

CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重检测不被批准用于血液或血浆捐献者的筛选。

结果的解释

• 阳性的CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重检测的结果表明目前已确诊登革热感染。
• 阴性的用该测试获得的结果不排除登革热的诊断。
  • IgM测试建议作为测试算法的一部分，并可确认诊断。
• 如果血样是在症状发作7天或更长时间后从患者身上采集的，则优选进行DENV IgM抗体的血清学试验。
  • 感染后3个月或更长时间内仍可检测到登革热病毒的IgM抗体。

化验分布

CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重检测法分发给实验室，这些实验室的人员在标准化分子诊断检测程序和病毒诊断方面受过培训并有经验，并有适当的生物安全设备和防护措施。请求可发送至DenguePCROrdering@cdc.gov.

美国实验室信息

CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重分析中提供的材料

• 方框1:检测试剂盒(引物和探针组)
• 方框2:阳性对照试剂盒(热灭活DENV-1、-2、-3和-4标准品的混合物)
• 方框3:人体样本提取控制(HSC)

请参见美国的包装插页此处(仅打印)[PDF–53页]

套件:rRT-PCR酶mastermix选项

试剂:invitrogen SuperScript III铂反应一步定量RT-PCR系统(无Rox)*

• 数量–100个反应
  • 目录号:11732-020
• 数量–500个反应
  • 目录号:11732-088

试剂盒:核酸纯化试剂盒选项

试剂:Qiagen QIAamp DSP病毒RNA微型试剂盒和Qiagen QIAcube仪器**

• 数量–50次提取
  • 目录号:71904和9001292

试剂:罗氏MagNA纯液相色谱总核酸分离试剂盒*

• 数量–192次提取
  • 目录号:03 038 505 001

* CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重检测测试性能要求在美国只有合格的辅助试剂批次才能用于该设备。任何未经CDC-登革热分支机构特别鉴定用于CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重检测的批次均不适用于本装置，并可能影响装置性能。

** Qiagen QIAamp DSP病毒RNA微型试剂盒(目录号71904)是根据良好生产规范(GMP)生产的。这些RNA提取试剂盒可以手动使用，也可以与QIAcube仪器(目录号9001292)结合使用。

国际实验室CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重检测信息

CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重分析中提供的材料

• 方框1:检测试剂盒(引物和探针组)
• 方框2:阳性对照试剂盒(热灭活DENV-1、-2、-3和-4标准品的混合物)
• 方框3:人体样本提取控制(HSC)

参见国际包装插页此处(仅打印)[PDF–51页]

联系信息、订购和产品支持

有关技术和产品支持，以及获取CDC DENV-1-4 rRT-PCR多重检测和合格辅助试剂列表，请直接联系CDC登革热分支支持团队。

有关订购和技术支持，请发送电子邮件至: DenguePCROrdering@cdc.gov。

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内容来源: 国家新发和人畜共患传染病中心