Contents
要点
- 对于需要进行炭疽检测的样本，实验室和临床工作人员必须遵循特定的样本采集、运输和处理流程。
- 采样地点取决于疑似炭疽病的类型。
- 如果怀疑是炭疽病，请咨询您所在州的卫生部门。
- 在寄送炭疽检测样本之前，请咨询您所在州的卫生部门和疾病控制与预防中心，以获得授权。
- 炭疽病是通过实验室响应网络内的实验室进行检测来确诊的。
概述
炭疽是由炭疽杆菌引起的。从临床标本中培养炭疽杆菌是诊断炭疽的金标准。根据症状类型或暴露途径 ，可以从以下标本中培养出炭疽杆菌 ：
- 腹水
- 活检组织
- 血
- 脑脊液（CSF）
- 胸膜液
- 直肠拭子（如果怀疑是胃肠道炭疽病）
- 皮肤病变液
在美国，医疗机构很少遇到炭疽病患者。 美国疾病控制与预防中心（CDC）提供临床指南和病例定义， 以帮助临床医生：
- 炭疽病的诊断
- 采集患者病史以确定暴露源
- 安排必要的诊断测试
记住
美国疾病控制与预防中心 (CDC) 炭疽病专家全天候 (24/7) 提供咨询服务，请致电 CDC 紧急行动中心 770-488-7100。
标本采集概述
为了准确诊断炭疽，理想情况下应在患者开始抗生素治疗前采集标本，前提是这样做不会延误治疗。采集哪些类型的标本进行检测取决于患者的暴露途径和/或症状 。
血液、血浆和血清
血液样本
血液样本有助于诊断吸入性炭疽和胃肠道炭疽，尤其是在患者出现全身感染症状时。血液样本将采用实时聚合酶链式反应 (PCR) 进行检测，以确诊炭疽。
- 检测炭疽时，用 EDTA 或柠檬酸钠（紫色或蓝色盖试管）采集 10 毫升血液。
- 对于儿科病例，收集允许的体积。
- 用于血液培养和实时 PCR 的样本应使用冷藏包运输。
血浆
血浆是检测所有类型炭疽致死因子（LF）毒素的首选样本。
- 疑似接触或出现症状后 0 至 18 天内可采集 LF 毒素检测样本。
- 由于抗菌治疗期间毒素水平会逐渐下降，因此最好尽早采集样本。
检测炭疽杆菌毒素时：
- 使用 EDTA 紫色盖试管收集 10 毫升血浆。
- 将样本置于冰上 30 分钟，然后进行离心。
- 血浆应使用干冰运输。
血清
血清可用于检测炭疽杆菌毒素。
- 可在疑似接触病毒或出现症状后 0 至 18 天内采集样本进行检测。
- 由于抗菌治疗期间毒素水平会逐渐下降，因此最好尽早采集样本。
请务必正确标记样本，以便实验室能够按照生物安全二级（BSL-2）规范处理血清样本。请勿寄送血培养瓶或全血。
下载或打印此资料， 以便在向美国疾病控制与预防中心 (CDC) 提交血液或血清样本时方便参考：
组织活检
皮肤炭疽
对丘疹或水疱（包括邻近皮肤）进行全层活检，可用于诊断皮肤炭疽。最好在患者开始抗生素治疗前进行活检。
如果患者尚未开始使用抗生素，或者开始使用抗生素的时间不足 24 小时，则执行以下两项操作：
- 取全层组织穿刺活检标本进行培养和实时 PCR 检测。
- 从丘疹或水疱（包括邻近皮肤）取一个全层穿刺活检样本，用于组织病理学、特殊染色和免疫组化检查。
如果患者就诊时正在服用抗生素：
- 从丘疹或水疱（包括邻近皮肤）取一个全层穿刺活检样本，用于组织病理学、特殊染色和免疫组化检查。
- 将样本放入10%中性缓冲福尔马林溶液中固定。不要冷冻。
本次活检的检测可能包括组织病理学、特殊染色和免疫组织化学（IHC）。
吸入性炭疽
对于出现吸入性炭疽症状的患者，应进行支气管或胸膜活检。
- 如果活检样本已用福尔马林固定，则应在室温下运送至美国疾病控制与预防中心（CDC）。切勿冷冻。
- 如果活检样本是新鲜冷冻的，则应将其储存在 -70°C 下，并使用干冰运送至美国疾病控制与预防中心。
- 活检标本应附有相关证明文件，包括：
- 简要的临床病史和病变描述
- 病变出现的时间顺序
- 治疗方案描述（包括疗程和剂量）
- 活检日期与开始抗生素治疗的时间关系
- 活检部位的照片、数码图像或示意图。
本次活检的检测可能包括组织病理学、特殊染色和免疫组化。
病灶拭子
皮肤炭疽
务必采集两份独立的拭子样本，一份用于实时 PCR 检测，一份用于细菌培养。拭子采样的具体位置取决于病变的阶段。
- 水疱期：以无菌方式，从先前未破裂的水疱中用无菌干棉签收集水疱液。
- 焦痂期：小心地提起焦痂的外缘，插入无菌湿棉签（预先用无菌生理盐水润湿），在焦痂边缘下方缓慢旋转棉签 2-3 秒，然后将其取出，以此收集焦痂物质。
- 溃疡期：如果没有水疱或焦痂，用无菌湿棉签（预先用无菌生理盐水润湿）擦拭溃疡底部。
对于用于培养或同时用于培养和实时 PCR 的样本，请使用冰袋运输，并储存在 2 至 8°C 的温度下。对于仅用于实时 PCR 检测的样本，请使用干冰运输，并储存在-70°C 的温度下。
胃肠道炭疽
务必采集两份独立的拭子样本，一份用于实时 PCR 检测，一份用于细菌培养。拭子采样的具体位置取决于病变的阶段。
- 口咽部：使用预先用无菌生理盐水润湿的棉签，对疑似病变的表面和边缘进行无菌擦拭。病变可能出现在口咽部、颊腔、舌头、扁桃体或咽后壁。
- 直肠：使用无菌干棉签采集直肠拭子。
对于用于培养或同时进行培养和实时 PCR 检测的样本，请使用冰袋运输，并储存在 2 至 8°C 的温度下。对于仅用于实时 PCR 检测的样本，请使用干冰运输，并储存在-70°C 的温度下。
收集胸膜或腹水积液用于吸入性或胃肠道炭疽
- 收集 1 mL 以上的胸腔积液到无菌容器中，用于培养、实时聚合酶链式反应 (PCR) 和炭疽杆菌毒素检测。
- 为了获得最佳检测结果，胸腔积液标本应在 2-8°C 下保存，保存时间不得超过 24 小时。
- 对于出现胃肠道炭疽或吸入性炭疽症状的患者，可以抽取腹水。
- 根据当地医院的规定，收集适量的腹水，以及进行培养、PCR 和炭疽杆菌毒素检测所需的腹水。
美国疾病控制与预防中心病理标本检测
提交样本
实验室和临床工作人员必须遵循采集和处理炭疽检测样本的具体操作规程。必须遵守所有炭疽标本的包装和运输法规及要求，以保护公众免受感染。
发货前样品
未经州卫生部门和美国疾病控制与预防中心（CDC）事先咨询并获得授权，请勿寄送任何标本或样本。如需炭疽检测咨询，请联系 CDC 紧急行动中心，电话：770-488-7100。
美国疾病控制与预防中心（CDC）接受来自州公共卫生实验室和其他联邦机构的样本进行分析。来自私人医疗机构的样本必须首先提交至市、县或州卫生部门实验室进行适当处理。
标本包装
实验室工作人员必须按照相关规定处理、包装和标记样本，以确保自身及他人免受炭疽感染的风险。您必须遵循以下具体步骤来包装和运送用于炭疽检测的样本：
应采取的步骤
- 插入吸水材料，然后放入样本瓶。将吸水材料（例如吸水片）放入可密封的塑料袋中，然后将装有血清样本的塑料小瓶放入袋中（1 号袋）。密封袋子。
- 在防漏的二级包装容器内衬上衬垫在防漏的二级包装容器（例如合适的塑料螺旋盖罐（运输罐））内衬吸水材料。吸水材料的用量应足以吸收塑料小瓶内的所有液体，以防发生泄漏或溢出。
- 放入运输罐中，贴上生物危害标签将密封塑料袋放入运输容器中。在运输容器外表面贴上生物危害标签。
- 将干冰放入外包装袋中。将干冰放入内衬聚苯乙烯泡沫的箱子（外包装箱）中。每天至少使用 6 磅（约 3 公斤）干冰；隔夜运输（2 天）至少需要 12 磅（约 6 公斤）干冰。
- 计算包装重量将冰的重量（磅）除以 2，即可得到冰的近似重量（公斤）。
- 将运输罐放入外包装中将运输罐放入外包装袋中。
- 添加内容明细清单和所需表格将物品清单和 CDC 表格 50.34 放入第二个塑料袋（2 号袋）中。
- 密封并放置袋子将袋子密封后放入外包装袋内。
类型
标本运输
美国交通部危险品运输法规以及国际航空运输协会（IATA）危险品规则规定以下标签和标记应贴在外包装的一侧：
- “UN 3373 生物物质，B 类”标记
- “杂项 9 类”标签（干冰标签，菱形底部标有数字 9）
- 此标签应包含干冰标记：“UN 1845 固体二氧化碳（干冰）”，其中必须列出盒子中包含的干冰的重量（以千克为单位）。
- 将冰的重量（磅）除以 2，即可得到冰的近似重量（公斤）。
- “过度包装”：这表示二级包装被放置在装有干冰的外包装箱中。
- 负责发货人员的姓名和电话号码。此人必须了解货物情况，并知道在发生泄漏或溢出时如何进行处理。
- 两组“双箭头”：一组贴在与运输标签同一侧的箱子上，另一组贴在箱子的另一侧。
- 美国交通部在 《联邦法规》49 CFR 171.8“危险品运输条例” 中对“超包装”进行了定义。用作单个托运人用来保护包裹或方便处理包裹，或将两个或多个包裹合并在一起的包装箱。
- 美国交通部危险品运输法规
- 国际航空运输协会（IATA）危险品规则
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