Cytokine ELISPOT & FluoroSpot Assays
塞菲娜·阿里夫，英国伦敦国王学院
检测原理
细胞因子 ELISPOT 检测是一种定量和定性相结合的检测方法，它基于酶联免疫吸附技术，旨在对分泌细胞因子的细胞进行计数；该方法灵敏度极高，因此可用于检测低频细胞因子分泌细胞（1/300,000）。通过追踪抗原刺激后释放的细胞因子，可以确定单个细胞的表达情况，从而计算 T 细胞应答频率。细胞可以在包被抗细胞因子抗体的板上进行刺激（直接检测），也可以先进行预刺激，然后再转移到预包被的板上（间接检测）（图 1）；检测完成后，即可使用酶标仪进行分析。
最近，该检测方法被改进为 FluoroSpot 检测方法，该方法利用荧光染料偶联的检测抗体，从而可以同时检测多种不同的细胞因子，并进行后续的 T 细胞亚群分析（图 2）。
ELISPOT/FluoroSpot 检测的主要应用是监测人类和动物的免疫反应；目前，改良版已被用作结核病的诊断工具。
细胞因子 ELISPOT 检测的应用
细胞因子 ELISPOT 检测已成功应用于免疫学的多个领域，包括器官移植、癌症研究、传染病、疫苗研发和自身免疫性疾病。这些检测方法的灵敏度已被证明在检测通常低频出现的自身反应性细胞方面非常有用（图 3）。ELISPOT 和 FluoroSpot 检测均广泛用于临床试验的免疫监测，因为在单细胞水平上进行定量分析和 T 细胞表型鉴定都具有很高的参考价值。
© 本作品的版权归英国标准协会 (BSI) 所有。
细胞因子 ELISPOT 和 FluoroSpot 检测.ppt（622 KB）
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